全外顯子測序

? ??技術簡介

全外顯子測序（Whole?Exome Sequencing，WES）是較常見的基因組測序方法，通過利用探針雜交富集外顯子區域的DNA序列，進行高通量測序，來發現與蛋白質功能變異相關遺傳突變的技術手段。外顯子是人基因組的蛋白編碼區域，雖僅占全基因組1%左右，但覆蓋了85%的致病突變。通過測序所獲取的數據，結合大量的公共數據庫提供的外顯子致病信息，有利于更好地解釋所得變異與疾病的關系。相比于全基因組測序，外顯子組測序更高深度、更加經濟、高效。

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? ??技術優勢

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l?直接對蛋白編碼序列進行測序，擁有可靠的基因突變鑒定方案和權威的突變鑒定軟件，找出影響蛋白結構的變異

l?高捕獲效率，高深度測序，可發現變異頻率低于1%的罕見變異

l?僅針對外顯子組區域，有效降低測序費用、存儲空間和工作

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? ??技術流程

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? ??應用領域及檢測意義：

l?單基因遺傳病：單基因病（孟德爾遺傳病）的輔助診斷

l?復雜性疾病：涉及多個系統的復雜疾病輔助診斷

l?家系/群體分析：通過大量病例關聯分析，尋找新基因或已知基因的新突變

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? ??數據分析

信息分析從測序的下機數據（raw data）開始，原始下機數據過濾掉接頭、低質量堿基、未測出的堿基（以N 表示）后比對到參考基因組上，進行SNP檢測和InDel或者CNV分析，然后通過數據庫注釋，對變異檢測的結果通過基于變異有害性、樣本情況和基因功能表型三種分析策略，篩選出于疾病相關的有害性位點或基因。另外, 為了保證高質量的測序數據，在整個分析流程中設置了嚴格的數據質控體系（QC）。

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? ??樣本類型

高純度DNA僅需50ng，全血僅需50ul，同時，來自羊水、流產物、干血片的DNA均可得到和正常樣本均一性和覆蓋度相差無幾的測序結果。

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? ??適宜人群

1.?所有單基因遺傳病疑似患者

2.?臨床危重病癥，預后判斷困難，需要明確診斷并選擇精準治療方案的患者

3.?臨床表型異質性強，病因復雜，常規診斷困難的多系統復雜疾病及綜合征患者

4.?已用系統panel檢測，但仍未確診的家族遺傳病患者

5.?家庭已有明確致病基因遺傳病息者，擬生育第二胎進行遺傳咨詢的患者及其親屬

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